Como calcular tempo morto na coluna LC

Cromatografia é amplamente usado no laboratório químico para determinar a identidade de um composto desconhecido . O composto desconhecido flui através do material de empacotamento da coluna e interage com as partículas . As interacções entre as partículas e os compostos na amostra baseiam-se na sua atracção ou solubilidade de um outro . As moléculas que não têm nenhuma interacção com as partículas de material de embalagem são autorizados a passar através do material de embalagem sem impedimentos. O tempo necessário para as moléculas passem do ponto de injeção no sistema para o pico máximo de uma molécula inerte é o tempo morto dos column.Things Você vai precisar de molécula
não reactivos
LC instrumento cromatografia
Amostra seringa
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1

Pico da amostra desconhecida , com uma pequena quantidade de um composto que não é retida pelo material da coluna . O composto irá passar através da coluna , sem interagir com o material de empacotamento da coluna .
2

Carregar a seringa com aproximadamente 20 microlitros de amostra e inserir a agulha da seringa no orifício de injecção . Coloque o circuito de amostra da válvula esvaziando a seringa na válvula.
3

Ligue o instrumento de cromatografia e começar a fase móvel . A fase móvel flui através do instrumento e transporta a amostra através da coluna e detector termina no recipiente de desperdícios .
4

Activar a válvula , o que permite que a amostra entrar no caminho de fluxo do solvente . O solvente transporta os compostos da amostra para o topo da coluna e a separação começa .
5

monitorar a saída de sinal do detector e identificar o primeiro pico no cromatograma . A diferença entre o tempo de injecção e o valor máximo do primeiro pico , representado pelo composto cravada, é o tempo morto .
6

medir a distância entre o ponto de injecção e a altura máxima do primeiro pico . Multiplique a distância pela velocidade do papel ou do eixo para encontrar o tempo morto.

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