Quais são os efeitos de um pH alcalino sobre a estrutura do DNA

? Normalmente cada molécula de DNA dentro de suas células contém duas vertentes unidas por interações chamadas pontes de hidrogênio . Mudança nas condições , no entanto, pode & quot; desnaturar & quot; o ADN e fazer com que estes fios se separar. Adição de bases fortes , como o NaOH , aumenta drasticamente o pH , diminuindo assim a concentração de iões de hidrogénio da solução e desnaturação do DNA de cadeia dupla . Efeitos de pH

A concentração de iões hidróxido e o pH tem uma correlação directa , ou seja, quanto maior for o pH , maior será a concentração de hidróxido . De igual modo , quanto menor for a concentração de iões de hidrogénio cai . A um pH elevado , em seguida , a solução é rica em iões hidróxido , e estes iões de carga negativa pode puxar os iões de hidrogénio fora de moléculas , como os pares de bases de ADN . Este processo interrompe a ligação de hidrogénio que contém as duas cadeias de ADN em conjunto , fazendo com que se separem .
ARN versus ADN

Ao contrário de RNA , DNA não tem um grupo hidroxilo na posição 2 ' , em cada grupo de açúcar . Esta diferença torna o ADN muito mais estável , em solução alcalina . No ARN , o grupo hidroxilo na posição 2 ' pode dar -se um ião de hidrogénio da solução a um pH elevado , criando um ião alcóxido altamente reactivo que ataca o grupo fosfato , segurando dois nucleótidos vizinhos em conjunto . O DNA não sofrem com esse defeito e, portanto, goza de notável estabilidade em pH elevado .
Alkaline Lise

Os biólogos moleculares muitas vezes fazem uso de desnaturação alcalina para isolar o plasmídeo DNA de bactérias . Os plasmídeos são pequenos laços de DNA separados do cromossoma bacteriano . Em uma miniprep de lise alcalina , biólogos adicionar detergente e hidróxido de sódio para bactérias suspensas em solução . O detergente dissolve a membrana da célula bacteriana , enquanto o hidróxido de sódio , o pH aumenta e torna a solução altamente alcalina . À medida que as células quebradas libertar o seu conteúdo , o ADN no interior separa-se em seus filamentos componentes , ou desnatura .
Recombinação

Depois o biólogo extrai o ADN de uma célula, ele adiciona um outro reagente para retornar a solução para um pH mais neutro e precipitar o detergente . A alteração do pH permite que os fios de plasmídeos para voltar a hibridar ; o cromossomo volumosos, no entanto, não pode fazer o mesmo , de modo que o biólogo pode removê-lo juntamente com o detergente , proteínas desnaturadas e outro lixo variado , deixando o plasmídeo trás. Lise alcalina não completamente purificar o ADN de plasmídeo ; ao contrário, ela serve como um? rápida e suja & quot; maneira de extraí-lo do celular e remover a maioria dos outros contaminantes.